それでは乳歯幹細胞由来の培養上清のつくりかたを説明しましょう。上の図をご覧ください。
まず子供の乳歯から歯髄組織を取り出します。この組織を酵素で分解し、マトリックスや血管、神経組織を濾過して歯髄細胞だけを抽出します。この細胞を子ウシの血清を含む培養液の中で継代培養すると増殖していきます。
（＊血清：血液の中の血漿から血球〔白血球、赤血球など〕、凝固作用のあるフィブリノーゲンをとりのぞいたもの）
細胞の数が一定以上に増えた時点で、血清を含まない培養液（無血清培地）に変更します。血清がなくては細胞は栄養がなくなるので生きてゆけません。
細胞はおどろいて、猛烈な勢いで仲間の細胞にメッセージを送ります。
この大量生産された生理活性物質のみを回収したのが培養上清です。

培養上清中には多くの種類の生理活性物質（ここからはサイトカインと略す）が含まれています。乳歯幹細胞培養上清（SHEDCM）中のサイトカインのごく一部を表にしたのが上の図です。赤字で書かれているのがSHEDCMだけに含まれているサイトカインです。また黒字で書かれているのがSHEDCMにも他の培養上清（骨髄、脂肪、臍帯幹細胞由来）にも含まれる一般的なサイトカインです。注目していただきたいのはSHEDCMの培養上清には神経の再生に関係するサイトカインが他の培養上清に比べて格段に多く含まれていて、濃度も高いということです。このことは神経疾患、（脳梗塞、アルツハイマー病、脊髄損傷、ALSなど）の培養上清治療でSHEDCMがもっとも効果が高いことを示しています。さらに抗炎症サイトカインやマクロファージの形質転換に関係する、MCP-1とSiglec-9の濃度が高いことも重要です。これはSHEDCMには炎症を抑え組織を再生する力が強いことを意味しています。
一方、SHEDCMよりも他の培養上清のほうが濃度が高いサイトカインもあります。つまり培養上清にはそれぞれ特性があり（別の言い方をすれば幹細胞に特性がある）疾患ごとに使いわける必要があるということです。
このように幹細胞の種類ごとに培養上清の特性があり、適応疾患がことなることは重大な事実です。おなじ培養上清といっても、使用した幹細胞がことなれば含有しているサイトカインの組成に違いがでるのは当然です。組成が異なればその培養上清がどの疾患あるいはどの組織の再生に適しているかは異なりますので培養上清を慎重に選択しなくてはなりません。
実際にわれわれがおこなった予備実験では骨の再生効果は骨髄幹細胞由来の培養上清（BMSC-CM）がSHEDCMより優れていました。なぜならば骨関連のサイトカインはBMSC-CMの方が多く含まれていたからです。ですから骨の再生治療にはBMSC-CMを使用すべきです。逆に、神経再生の関連するサイトカインはBMSC-CMよりSHEDCMに多く含まれていました。したがって神経疾患の培養上清治療にはSHEDCMが適しています。
例えば、おなじ「抗がん剤」といってもそれぞれ作用機序、標的細胞がことなるのですから、どの種類のがんにも同じ抗がん剤を投与するのが間違いであるのと同じです。 下の表では、SHEDCMだけに含まれているサイトカインの効果をまとめてみましたので参考にしてください。

　このように培養上清中のサイトカインは非常に多彩で現時点でもすべてが分析できているわけではありません。しかもそれぞれのサイトカイン量はきわめて微量です。そのうえ上の図でもわかるように、GDF-15（増殖効果）とIL-28A（抑制効果）のように効果が相反するサイトカインも含まれています。それでも組織は再生します。
なぜでしょう。実はこのことこそが「培養上清治療」の特徴なのです。一般的な薬物療法は一種類の薬剤（サイトカインを含む）を大量に投与して病気をなおします。
だから場合によっては副作用があらわれます。しかし培養上清治療では微量のサイトカインの複合作用によって組織を再生させます。いわば自然治癒の過程で起こっている現象を再現するわけです。したがって副作用はほとんどみられません。いうならば培養上清は、「幹細胞が生んだ天然薬」なのです。
本章では培養上清の作り方、それに含まれるサイトカインの組成と適応疾患について解説しました。
最後に、培養上清を実際に臨床応用する場合の適切な投与量について言及したいと思います。医療関係者の方々が自分の患者さんに培養上清治療を行う際に、投与量の決定が一番問題になるでしょう。一般に培養上清のヒト投与量は、動物実験で実証された有効投与量を基に理論値が算出されます（「培養上清の安全性」参照）。したがって動物実験の裏打ちのない、培養上清の投与は非科学的といわねばなりません。さらにこのように科学的な手続きを経て決定された投与量をもとに多施設共同研究を重ね、それらのデータのメタ分析を行い、最終的なプロトコルを決定する必要があります。SAISEIKENでは現在、糖尿病、アルツハイマー病、関節リウマチ、アトピー性皮膚炎、慢性脳梗塞などで多施設共同研究とデータ解析を実施しています。
適切なプロトコルを確立し皆さまと共有し、安全で有効な培養上清治療をすすめてまいります。

＊メタ分析（meta-analysis:複数の研究の結果を統合し、より高い見地から分析すること、メタ分析は根拠に基づく医療（ＥＢＭ）において、もっとも質の高い根拠とされている。

培養上清にはそれぞれ特性があり、どの疾患にどの培養上清を使用するのがベストかを調査したうえで使用する必要がある述べました。名古屋大学の上田実名誉 教授の長年にわたる研究や臨床経験により立証されたエビデンスはSAISEIKEN独自のプロトコルにより厳格に管理・抽出された印の培養上清液のみ有効です。 国内外のすべての様々な培養上清治療に適用されるエビデンスではありません。
培養上清治療について詳しくはお問い合わせください。

現在世界中で、これまで治療法がなかった難病に対して幹細胞治療の臨床試験が行われています。つぎつぎに発表される論文では幹細胞治療の持つ大きな可能性が示されています。しかし現時点で行われている幹細胞治療はあくまで実験的な医療であることをわすれてはなりません。患者数全体から見ればごく一部の患者さんに対して行われた特殊な医療なのです。幹細胞治療を誰でもがうけられる一般医療にするためには、多くのハードルをクリアしなくてはなりません。なかでも幹細胞のがん化リスク、肺栓塞は最初に解決しなければならない問題です。新しい医療技術の開発に求められる「絶対条件」は安全性だからです。残念ながら生きた幹細胞を移植する限りこれらのリスクを完全に消去することはできないのです。仮にリスクをゼロにできたとしても、幹細胞の規格化、保存法、輸送法、投与法などの課題が残っています。そのうえで治療費用、治療時間などの現実的な問題に向き合わねばなりません。とくに治療費用の問題は今後すべての先端医療の開発で避けて通れない課題といえるでしょう。
培養上清治療が実用化したときのもっとも望ましい姿は、培養上清が、いつでもつかえて一定の治療効果が保証された「既製品」であることです。また培養上清治療をうける患者さんにとってもそれを投与するドクターにとっても負担の少ない医療行為であり、それらが適切な費用で行われなくてはなりません。SAISEIKENはこれらの条件を整えるために努力を続けます。

培養上清治療は幹細胞治療の進化系として生まれました。
培養上清治療は幹細胞治療と同等の効果があることはほぼ間違いがありません。
培養上清治療は幹細胞治療の優れた治療効果を、幹細胞の移植なしに実現できます。
幹細胞移植に伴うさまざまな問題を一気に解消し、再生医療の恩恵を適正な価格でだれもが享受できてこそ、再生医療は真の大衆医療になることができるのです。
培養上清にはこれを実現する力があります。

最後に培養上清治療と幹細胞治療の比較を上の図にまとめてみました。
培養上清治療が新しい再生医療として確立されることによって、これまで治療法がなかった難病に苦しむ患者さんに勇気と希望がもたらされることを願います。