つぎにSHEDCMが細胞の突然変異を起こさない事、アレルギー反応を起こさない事を確認しました。
SHEDCMの非変異原生を確認するためにヌードマウスをもちいてAmes試験、染色体異常試験が行われました。つぎに非アレルギー性を確認するためにヒトで皮膚感作試験（ＬＩＮＡ）、パッチテスト（24時間閉鎖）が実施され、その安全性が確認されました。

SHEDCMに毒性がないことを確認するためにマウスとビーグル犬をつかった単回および反復静脈内投与での非臨床毒性試験を実施しました。
（単回投与：１回だけの投与、反復投与：同じ個体に何度も繰り返し投与）
マウスの急性毒性試験ではSHEDCMを20ml/kg(マウスの体重を25gとすると０．５ｍｌ)尾静脈より単回投与しました（雌雄各5匹）。対照群としてＬ-グルタミン含有ＤＭＥＭ培地を同用量投与しました（雌雄各5匹）その結果、試験群および対照群ともに、14日間の観察期間中、死亡や異常はみられませんでした。また投与後7日および14日における体重値は、試験群および対照群で差がなく、観察期間終了後の剖検においても、すべての試験動物の臓器で異常を認めませんでした。
イヌをつかった反復投与毒性試験では、ビーグル犬の前腕橈側皮静脈より1週ごとに12回２０ｍｌ/kgのＳＨＥＤＣＭを投与しました（雌雄各2頭）。対照群としてはL-グルタミン含有ＤＭＥＭ培地を同量で投与しました（雌雄各1頭）。試験群および対照群ともに、健康状態を3カ月間観察するとともに、経時的に3カ月間採血を行い、血液学的、血液生化学的検査を行ないました。また最終投与後より1週後に剖検を実施しました。
その結果、3カ月の観察期間中、動物の健康状態に異常はみられず、血液学検査、血液生化学的検査においても異常は観察されませんでした。剖検の結果でも、肉眼的、組織学的に臓器の異常は認められませんでした。

動物でのSHEDCMの安全性を確認した後で、ヒトを対象とした臨床治験・第I相試験に準じた臨床研究が行われました。
臨床治験とは新しい医薬品について安全性および有効性を検証し、政府など公的な機関の承認を得ることを目的として行われる試験です。また第I相試験とは未承認の薬剤（この場合はSHEDCM）の安全性を確認するために、主として健常男性ボランテイを対象に実施するものです。
SHEDCMのような未知の薬剤の、ヒトを対象とした臨床研究でもっとも重要な検討項目は、初回投与量の決定です。
ヒト初回投与量の決定には、動物で行われた実験結果（前臨床試験）が参考にされることが通例です。われわれは、過去に行ったマウス糖尿病モデルを使った実験のデータを初回投与量の算出に使用することにしました。糖尿病モデルが使用されたのは、われわれが行った動物実験のなかで、もっとも多くの困難で大量の培養上清を必要としたからです。つまり将来のSHEDCMをつかった培養上清治療における安全域設定のための一つの基準になりえると考えたのです。
ここで、われわれの行った実験を簡単に説明しましょう。
実験では、はじめにマウスを高カロリー飼料で飼育することでⅡ型糖尿病モデルを作成します。そしてヒト乳歯幹細胞の無血清培養上清（SHEDCM）を1回0・5ｍｌ（1日2回）を61日間点滴靜注します。マウスの体重（約25ｇ）から計算すると投与量は40ｍｌ/kg/回に相当します。この投与により対照群（ＤＭＥＭ培地投与）に比べて、膵臓β細胞の機能的改善（腹腔内糖負荷試験、膵臓インスリン含量の増加）、インスリン抵抗性の改善（インスリン負荷試験）が認められました。
ヒト初回投与量の決定に際しては、まず動物実験を参考に、推定最少薬理作用量（ＭＡＢＥＬ：Minimal Anticipated Biological Effect Level）を安全係数10で除し、体重当たりのヒトの初回投与量（4ｍｌ/kg/回）の理論値を決定します。つぎに実際の初回投与量は、安全性を考慮して、1週間かけて少しずつ増量し異常のないことを確認したうえで初回投与量を決定しました。具体的なＳＨＥＤＣＭの投与方法は、ＳＨＥＤＣＭを輸液と混合し、（総量100ｍｌ～500ｍｌとして）1日2回点滴投与しました。体重60㎏のヒトの場合、19.2ｍｌ/日から開始し、下表に従い7日間で480ｍｌ/日まで増量します（漸増期）。異常がなければ、これを糖尿病の初回投与量とします。さらに入院下で、同量のＳＨＥＤＣＭを2週間連日投与し、異常がなければこれを維持投与量としました。漸増期は初回投与量を決めるための期間、維持期はＳＨＥＤＣＭの反復投与での安全性を確認するための期間といえるでしょう。

臨床研究に参加した被験者およびその詳細情報は以下の通りです。